突变型PSMB5通过下调非小细胞肺癌抗原加工呈递功能介导抗PD-1免疫治疗耐药

作者：韩解非; 陈恺; **; 陈峰; ***^*

来源：循证医学, 2023, 23(01): 47-53.

DOI：10.12019/j.issn.1671-5144.2023.01.008

• PSMB5
• 免疫治疗
• 耐药

目的 探讨突变型编码蛋白酶体B5亚基的基因（proteasome subunit beta 5,PSMB5）介导非小细胞肺癌抗程序性死亡受体1(programmed death 1,PD-1)免疫治疗继发耐药的作用及机制。方法 对6例接受免疫治疗的继发PSMB5 p.A79T或p.M104I突变的非小细胞肺癌患者治疗前及耐药后肿瘤组织进行RNA测序，对比基因表达差异。利用I-Mutant 2.0评估PSMB5突变对蛋白稳定性的影响。对抗PD-1免疫治疗前后的肿瘤组织通过免疫组化检测CD8表达水平。流式分选患者免疫治疗期间的PD-1+CD8+T细胞，并进行T细胞受体（T cell receptor,TCR）测序，结合外周血游离细胞DNA(cell free DNA,cfDNA)测序结果进行克隆进化分析。利用肿瘤细胞与T细胞共培养体系，明确突变型PSMB5对T细胞应答的影响。结果 PSMB5 p.A79T或p.M104I突变可导致蛋白稳定性降低，基因信号通路富集分析（gene set enrichment analysis,GSEA）提示突变型PSMB5相比免疫治疗前野生型PSMB5抗原呈递能力下降，同时微环境中细胞溶解评分也低于基线水平。免疫组化结果指出，突变型PSMB5肿瘤组织中CD8表达较野生型显著减少。通过外周血cfDNA及TCR动态监测及克隆分析，随着PSMB5克隆的出现，PD-1+CD8+TCR并未呈现出相应的丰度变化，提示未发生有效免疫应答。在突变型/野生型PSMB5肿瘤细胞与T细胞共培养的过程中，突变型PSMB5未能刺激T细胞的扩增，同时流式细胞术检测突变型PSMB5 4-1BB CD8 T细胞的比例明显低于野生型。结论 突变型PSMB5可能下调肿瘤细胞抗原加工呈递功能，介导T细胞的应答障碍从而导致免疫治疗继发耐药。

• 单位
  首都医科大学附属北京天坛医院; 北京市朝阳区三环肿瘤医院