本发明公开了一种ATDC5向软骨分化的诱导方法,包括以下步骤:采用改进的micromass培养办法将已经团聚成micromass的细胞团整块吹起,随后转移到琼脂糖上悬浮软骨诱导,诱导时间为14天。本发明既满足软骨诱导所需的密集培养的条件,又可以避免与培养板直接接触而导致纤维软骨的形成,同时还可以利用琼脂糖促软骨分化的特性促进细胞的软骨分化。