摘要
目的:初步筛选并鉴定出人乙酰肝素酶(HPSE)基因内具有增强子(enhancer,enh)活性的DNA片段。方法:增加Kpn I、Sal I酶切位点,将含有报告基因增强型绿色荧光蛋白(pEGFP)质粒载体pEGFP-N1改造为pEGFP-MU。选取HPSE基因5'端启动子上、下游的DNA序列并分为10个片段,分别命名为enhx(x分别等于1、2、3……10),每段长1 200 bp,相邻两段间重复200 bp。分别扩增上述10个片段和猿猴病毒40(SV40)增强子序列,分别插入pEGFP-MU,以构建重组质粒pEGFP-MU-enhx和pEGFP-MU-SV40e,并用脂质体2000转染肝癌细...
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单位皖南医学院弋矶山医院