沉默RhoA基因对腺样囊性癌细胞迁移和侵袭的影响

作者：迟增鹏; 周建华; 李文健; 王莹; 徐晓妹; 陈正岗^*

来源：口腔疾病防治, 2022, 30(04): 237-244.

• 小干扰RNA
• RhoA
• 腺样囊性癌
• 上皮-间充质转换
• 迁移
• 侵袭
• E-钙黏蛋白
• N-钙黏蛋白
• 波形蛋白

目的探讨RhoA基因对唾液腺腺样囊性癌(salivary adenoid cystic carcinoma,SACC)细胞的迁移和侵袭能力的影响。方法将液氮冻存的20例SACC及正常癌旁组织研磨匀浆,分别提取总RNA和总蛋白检测RhoA的表达情况。同时构建RhoA-siRNA转染2个细胞株SACC-LM和SACC-83细胞进行细胞学实验,实验分为实验组(转染RhoA-siRNA基因),阴性对照组(转染siRNA-NC基因)和空白对照组。通过qRT-PCR检测各组细胞RhoA的mRNA表达并确定转染效率;Western blot分析各组细胞RhoA及上皮-间充质转换(epithelialmesenchymal transition,EMT)标志分子(E-cadherin、N-cadherin、Vimentin)的蛋白表达;Transwell实验及划痕实验分析各组细胞侵袭和迁移能力的变化。结果与正常癌旁组织相比,RhoA mRNA和蛋白相对表达量在SACC组织中增高(P <0.01);实验组与对照组相比,RhoA mRNA的相对表达量和蛋白的相对表达量降低,E-cadherin蛋白的相对表达量增加,N-cadherin、Vimentin蛋白的相对表达量降低(P <0.01);实验组细胞侵袭和迁移能力降低(P <0.01)。结论 RhoA在SACC组织中表达增高;体外沉默RhoA基因可有效抑制SACC-LM和SACC-83细胞迁移和侵袭能力,其可能通过作用EMT影响SACC细胞迁移和侵袭能力。

• 单位
  大连医科大学; 青岛市市立医院; 潍坊医学院; 青岛大学; 济南市第四人民医院