NRG1FP对小鼠精原细胞系GC-1细胞增殖的影响及作用机制研究

作者：王程; 苗馨月; 金祉延; 刘佳豪; 胡烨玮; 赵玮; 陈丽丽; 金玉姬^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2022, (11): 110-142.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2021.09.0228

• 神经调节蛋白1
• 功能肽段
• 精原细胞
• 增殖
• 钙池操纵性钙内流

为了研究神经调节蛋白1功能肽段(NRG1FP)对小鼠精原细胞系GC-1细胞增殖的影响及其作用机制，试验采用Western-blot验证精原细胞系GC-1细胞中是否存在NRG1受体——ErbB2和ErbB4。利用大肠杆菌原核表达体系制备NRG1FP蛋白，用NRG1FP和/或细胞外钙离子(Ca2+)作用于精原细胞系GC-1细胞后，采用CCK-8试剂盒评价细胞增殖情况，采用Fura-2AM荧光染色观察和测定细胞质Ca2+浓度变化，Western-blot测定基质相互作用分子1(STIM1)、钙通道蛋白Orai1、钙调蛋白(CaM)、CaM依赖性蛋白激酶Ⅳ(CaMKⅣ)、环磷酸腺苷反应元件结合蛋白(CREB)的表达量以及CaMKⅣ、CREB的磷酸化水平。结果表明：精原细胞系GC-1细胞中存在NRG1受体——ErbB2和ErbB4蛋白。大肠杆菌原核表达系统制备的NRG1FP蛋白可显著促进精原细胞系GC-1细胞增殖(P<0.05),且在细胞外存在Ca2+条件下增殖活性最高，显著高于对照组(P<0.05)。NRG1FP蛋白可触发钙池操纵性钙内流(SOCE)。STIM1、Orai1、CaM相对表达量及p-CaMKⅣ、p-CREB蛋白的相对表达量显著上调(P<0.05)。说明NRG1FP可调控SOCE并激活CaM/CaMKⅣ/CREB信号通路，进而促进小鼠精原细胞系GC-1细胞的增殖。

• 单位
  吉林医药学院; 延边大学; 基础医学院