间充质干细胞源性外泌体调控NF-κB信号通路抑制髓核细胞凋亡

作者：肖权; 徐长明; 王永超; 周全^*

来源：东南国防医药, 2020, 22(05): 449-455.

• 间充质干细胞
• 髓核细胞
• 凋亡
• 外泌体
• 核因子-κB

目的探究骨髓间充质干细胞源性外泌体(BMSC-Exo)对髓核细胞凋亡的影响及其机制。方法分离培养大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs),提取BMSC-Exo。分离培养髓核细胞,先取部分细胞分为内毒素组、内毒素+二硫氨基甲酸肽吡咯烷(PDTC)组,分别加入内毒素500μg/mL、内毒素500μg/mL+PDTC 5μmol/L孵育24 h。流式细胞仪检测细胞凋亡率。另取细胞分为对照组、退变组、外泌体组、佛波醇酯组,分别采用基础培养基,内毒素500μg/mL刺激,内毒素和外泌体20μg刺激,内毒素、外泌体和佛波醇酯50μg/mL刺激培养24 h。流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测Cleaved Caspase-3、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)表达情况。结果成功分离培养BMSCs并提取BMSC-Exo。内毒素+PDTC组细胞凋亡率[(1155±086)%]较内毒素组[(2863±286)%]降低(t=9909,P=0001)。对照组凋亡率[(905±161)%]较退变组[(2948±283)%]显著升高(t=-10874,P=0000);与退变组相比,外泌体组下降至(1508±165)%,差异有统计学意义(t=7620,P=0002);与外泌体组相比,佛波醇酯组升高至(2541±138)%,差异有统计学意义(t=-8323,P=0001)。与对照组比较,退变组p-IκBα蛋白表达升高(t=-10575,P=0000),Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(t=-8506,P=0001);与退变组比较,外泌体组p-IκBα蛋白表达降低(t=10052,P=0001),Cleaved Caspase-3蛋白表达降低(t=7419,P=0002);与外泌体组比较,佛波醇酯组p-IκBα蛋白表达升高(t=-12125,P=0000),Cleaved Caspase-3蛋白表达升高(t=-8421,P=0001)。结论 BMSC-Exo可抑制内毒素诱导的髓核细胞凋亡,其作用可能是通过抑制NF-κB信号通路实现的。

• 单位
  徐州医科大学; 南京医科大学康达学院; 涟水县人民医院