HPLC法测定红细胞中6-硫鸟嘌呤核苷酸和6-甲基巯嘌呤的浓度及其在炎症性肠病患者治疗药物监测中的应用

作者：余恒毅; 李冬艳; 任秀华; 向东; 李喜平; 刘璐; 刘东^*; 贡雪芃^*

来源：中国医院药学杂志, 2023, 43(01): 11-15.

DOI：10.13286/j.1001-5213.2023.01.02

• 硫唑嘌呤
• 6-硫鸟嘌呤核苷酸
• 6-甲基巯嘌呤
• 高效液相色谱法
• 治疗药物监测

目的:建立高效液相色谱法(HPLC-UV)测定人红细胞中硫唑嘌呤代谢物6-硫鸟嘌呤核苷酸(6-TGN)和6-甲基巯嘌呤(6-MMP)的浓度，用于炎症性肠病患者治疗药物监测。方法:300μL红细胞裂解液加入二硫苏糖醇溶液(0.5 mol·L-1)60μL,40μL高氯酸(70%)沉淀蛋白后，酸性条件下6-TGN水解生成6-硫鸟嘌呤(6-TG),6-MMP水解反应生成4-氨基-5-(甲硫基)羰基咪唑。Diamonsil C8(2)色谱柱(200 mm×4.6 mm, 5μm),流动相为甲醇/20 mmol·L-1磷酸二氢钾溶液(含0.1%磷酸),梯度洗脱，流速0.95 mL·min-1,柱温30℃,6-TG、6-MMP检测波长分别为340 nm和303 nm。结果:6-TG在0.12～12μmol·L-1、6-MMP在0.3～30μmol·L-1浓度范围内线性关系良好，批内、批间精密度及准确度满足要求，成功用于炎症性肠病患者的治疗药物监测。结论:本文考察了影响6-TGN和6-MMP水解反应的重要因素，开发出稳健、快速、操作简便的HPLC-UV法，可用于常规监测炎症性肠病患者红细胞中6-TGN及6-MMP浓度，为硫嘌呤类药物个体化治疗提供依据。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院