亚洲带绦虫包虫诊断抗原P-29基因克隆表达

作者：周灵贵; 戴佳琳; 黄江; 廖兴江; 胡旭初; 余新炳; 申萍香; 郎书源

来源：中国公共卫生, 2009, 25(09): 1090-1092.

DOI：10.3321/j.issn:1001-0580.2009.09.035

• 亚洲带绦虫
• 包虫诊断抗原P-29
• 基因克隆
• 原核表达
• 免疫反应性

目的识别亚洲带绦虫包虫诊断抗原P-29(Hydatid disease diagnostic antigen P-29)的已知序列并行克隆和蛋白表达及免疫学研究。方法利用在线生物信息学工具序列分析后以亚洲带绦虫成虫包虫诊断抗原P-29基因克隆到原核表达质粒pET-28a(+)中,在大肠埃希菌BL21/DE3中诱导表达,重组后的蛋白用His-镍蛋白纯化柱纯化,纯化的重组蛋白用蛋白印迹进行免疫学分析。结果重组体构建成功并以包涵体形式存在,破包涵体纯化蛋白并得到高纯度的蛋白,且该重组蛋白可被亚洲带绦虫及牛带绦虫病人血清识别,表明其具有免疫反应性。结论亚洲带绦虫成虫包虫诊断抗原P-29可在原核表达系统中获得具有免疫活性的高效表达。

• 单位
  中山大学中山医学院; 贵州医科大学