成肌细胞外泌体诱导骨髓间充质干细胞成肌分化的实验研究

作者：陈青江; 陈肯; 罗文娟; 王林燕; 陈益; 蔡多特; 高志刚; 舒强^*

来源：中华小儿外科杂志, 2022, 43(10): 932-936.

DOI：10.3760/cma.j.cn421158-20220521-00382

• 间充质干细胞
• 外泌体
• 成肌细胞
• 骨骼肌
• 生长因子

目的探索成肌细胞外泌体诱导骨髓间充质干细胞成肌分化的可行性。方法大鼠骨骼肌卫星细胞经体外培养成肌分化, 提取成肌细胞外泌体与骨髓间充质干细胞共孵育, 诱导其向骨骼肌分化, 检测成肌分化以及各生长因子分泌变化。结果通过酶消化分离、差速贴壁提取的肌卫星细胞, Pax7表达阳性, 增殖、分化后Myogenin、Desmin及Myosin表达阳性, Desmin流式细胞鉴定阳性率为94. 5%。超速离心法提取到圆形或椭圆形的成肌细胞外泌体, 外形呈杯状, 磷钨酸负染;WB检测CD9、CD63、CD81及TSG101表达阳性。GFP标记的外泌体可被骨髓间充质干细胞摄取。外泌体与骨髓间充质干细胞共同孵育, 3 d后Myogenin表达阳性, 6 d后Desmin与Myosin表达阳性。ELASA检测细胞上清胰岛素样生长因子Ⅰ(insulin like growth factor, IGFⅠ)、肝细胞生长因子(heptocyte growth factor, HGF)及成纤维生长因子(fibroblast growth factor2, FGF2)水平明显升高。结论成肌细胞外泌体在体外能诱导骨髓间充质干细胞向成肌分化, 刺激各种生长因子分泌可能是外泌体促进细胞增殖、分化的机制之一。

• 单位
  浙江大学医学院附属儿童医院