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摘要
目的 构建重组铜绿假单胞菌自组装纳米颗粒疫苗rePO-GroES，在肺炎模型中评价其保护作用并阐明其免疫保护机制。方法 通过基因融合的方式，将编码铜绿假单胞菌保护性抗原PcrV-OprI(rePO)的编码基因连接至伴侣分子GroES基因的C端，构建并制备rePO-GroES蛋白；肌注rePO-GroES免疫小鼠后检测小鼠血清中特异性抗体、抗体亚型效价和脾细胞中分泌IFN-γ、IL-17A和IL-4的细胞比例；使用急性铜绿假单胞菌肺炎模型，评估rePO-GroES的保护效果。结果 溶液中rePOGroES组装成分布均一的纳米颗粒，平均粒径约为28.2 nm;rePO-GroES免疫组小鼠生存率显著高于rePO免疫组和对照组，rePO-GroES免疫组体质量减轻幅度、感染状态评分、病理损伤程度、肺部细菌量和炎症反应均低于rePO免疫组和对照组；rePO-GroES免疫组小鼠血清中抗rePO IgGs滴度显著高于rePO免疫组和空白组，其中IgG1含量最高；rePO-GroES免疫组小鼠脾细胞中分泌IFN-γ、IL-17A和IL-4的细胞数均显著高于rePO免疫组和对照组。结论 自组装纳米颗粒疫苗rePO-GroES安全性良好、免疫原性强、保护效果显著，是一个良好的铜绿假单胞菌候选疫苗。
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