摘要
【目的】鉴定疣吻沙蚕转录组中简单重复序列(SSR)位点,并分析其分布规律,为该物种多态性SSR分子标记的高效开发提供理论依据。【方法】利用高通量测序技术获得疣吻沙蚕的转录组数据,经过滤、组装后使用MISA搜索鉴定SSR位点,分析其序列特征及分布规律,初步验证SSR引物的有效性,并对有效扩增引物进行多态性分析。【结果】从转录组数据组装获得79420条Unigenes,总长度为104411064 bp,N50值和N90值分别为1902和331 bp。从79420条Unigenes中鉴定到9932个SSR位点,分布在8707条Unigenes上,其中1029条至少包含1个SSR位点,SSR出现频率为8.49%,发生频率为7.43%,丰度为58.85个/Mb(未计入单核苷酸重复)。SSR重复类型共133种,重复次数为4~26次,主要集中在4~15次,长度≥20 bp的SSR约占SSR总数的20%。SSR优势重复基序为二核苷酸、单核苷酸和三核苷酸,发生频率分别为40.29%、32.12%和21.76%,其中二核苷酸重复基序以AT/TA为主,占比79.88%,单核苷酸和三核苷酸分别以A/T和AGC/GCT为主,占比分别为65.92%和29.06%。SSR位点以中等多态性的Ⅱ型为主,共有7296条,占SSR总数的80%,而高度多态性的Ⅰ型有1813条,占SSR总数的20%。筛选到11对多态性引物,每对引物平均产生3.73个多态性片段。【结论】疣吻沙蚕转录组SSR类型丰富,且具有较高的多态性,可用于SSR分子标记开发,对其种质资源评价与保护利用、种群遗传学及分子育种研究等具有实用价值。
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