非洲猪瘟病毒p30蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定

作者：王俊荣; 张路捷; 胡永新; 吴晓东; 白娟^*; 高雁怩; 姜平^*

来源：中国兽医科学, 2023, 53(08): 947-955.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2023.0121

• 非洲猪瘟病毒
• p30蛋白
• 单克隆抗体
• B细胞抗原表位

为了解析非洲猪瘟病毒（ASFV）p30蛋白的抗原表位，以原核表达的重组p30蛋白为免疫原免疫6周龄雌性BALB/c小鼠，以杆状病毒系统表达纯化的p30蛋白间接ELISA为单抗筛选方法，研制出12株单抗，细胞培养上清抗体效价均大于1∶6 400。1G2单克隆抗体的重链属于IgG2b，其余11株单抗的重链均属于IgG1，轻链均为κ型。Western-blot和间接免疫荧光试验结果显示，这些单克隆抗体均能与ASFV感染的猪肺泡巨噬细胞发生特异性反应。通过p30蛋白基因截短表达和Western-blot发现，这12株单抗分别识别4个抗原表位，包括11MEVIFKTDLRSS22,82EWNMILHVLFEEETES97,107KNDNETNECTSSFETL122,122LFEQEPSSEVPKDSKL137。本研究结果为非洲猪瘟病毒诊断和生物学研究提供了有用的生物学材料。

• 单位
  南京农业大学; 中国动物卫生与流行病学中心