质膜钙ATP酶异构体2在新生大鼠螺旋神经节细胞中的表达

作者：陈请国; 褚汉启; 王显红; 陈金; 李建玲; 崔永华

来源：中华耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2010, 45(2): 128-132.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1673-0860.2010.02.010

• 螺旋神经节
• 质膜钙转运ATP酶类
• 大鼠

目的 研究乳鼠内耳螺旋神经节细胞(spiral ganglion cell,SGC)质膜钙ATP酶异构体2(plasma membrane Ca~(2+)-ATPase isoform 2,PMCA2)的表达情况,并进一步检测其A端和C端剪接位点所表达的剪接变异体.方法 取出生3～4 d的sD大鼠螺旋神经节组织,体外培养鉴定后通过免疫荧光法检测SGC的PMCA2表达情况;取出生3～4 d大鼠的耳蜗,通过冰冻切片检测PMCA2在螺旋神经节中的表达;收集体外培养的SGC,Trizol法提取总RNA并反转录成cDNA,分别通过巢式PCR和普通PCR法检测PMCA2 A端和C端的剪接变异体.结果 体外培养的SGC胞体透亮,活性良好,神经元标记物NF-200抗体染色阳性.SGC胞膜、胞质和轴突均发出强烈绿色荧光,PMCA2表达阳性.耳蜗切片中螺旋神经节组织亦强烈表达PMCA2.SGC表达的PMCA2 A端剪接变异体为PMCA2z,而C端的剪接变异体为PMCA2b和PMCA2c.结论 新生大鼠SGC强烈表达PMCA2,并在其A端和C端存在不同的剪接变异体.

• 单位
  咸宁学院; 华中科技大学同济医学院附属同济医院