沉默EZH2诱导舌癌Tca-8113细胞凋亡及其对放射敏感性的影响

作者:方政; 袁惠芳; 赵军方*; 孙明磊; 乔彬; 吴大鹏; 李新明; 孙强
来源:中华放射医学与防护杂志, 2018, 38(08): 561-566.

摘要

目的探讨zeste基因增强子同源物2(enhancer of zeste homolog 2,EZH2)对舌鳞癌细胞凋亡及放射敏感性的影响。方法以舌鳞癌Tca-8113细胞为研究对象,细胞转染EZH2小干扰RNA(EZH2 siRNA1、EZH2 siRNA2)及小干扰RNA阴性对照(siRNA-NC),RT-PCR和Western blot检测EZH2表达水平,筛选干扰效果较好的EZH2 siRNA2继续研究。将转染EZH2 siRNA2后的Tca-8113记为EZH2 siRNA2组,同时以不做处理的细胞为对照组,用8 Gy剂量照射转染siRNA对照组和EZH2 siRNA2细胞,并依次命名为照射组和联合组,四甲基偶氮唑盐(MTT)检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Western blot检测信号转导与转录因子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(pSTAT3)、活性Caspase-3(Cleaved Caspase-3)表达。siRNA-NC组和EZH2 siRNA2组细胞用0、2、4、6、8 Gy剂量照射处理后,细胞克隆实验检测放射敏感性。结果 EZH2 siRNA1、EZH2 siRNA2均能够干扰舌鳞癌细胞中EZH2的表达,且EZH2 siRNA2干扰效果最好(tmRNA=8. 660,PmRNA<0. 01;t蛋白=2. 883,P蛋白<0. 05)。下调EZH2 siRNA2组细胞凋亡率为(29. 90±1. 64)%,联合组凋亡率为(38. 17±1. 59)%,二者比较,差异有统计学意义(t=4. 742,P <0. 05),同时下调EZH2还可以降低p-STAT3水平,促进Cleaved Caspase-3蛋白表达。干扰EZH2表达后Tca-8113细胞辐射增敏比为1. 668。结论干扰EZH2表达能够协同放疗促进舌鳞癌细胞凋亡,抑制舌鳞癌细胞增殖,增加舌鳞癌细胞放射敏感性。