真核表达载体PcDNA3.1-BDNF的构建及其在骨髓基质细胞中的表达

作者：刘嘉晖; 赵宇; 欧阳嶷; 何志义

来源：解剖科学进展, 2012, (03): 247-250+254.

DOI：10.16695/j.cnki.1006-2947.2012.03.012

• 脑源性神经营养因子
• 骨髓基质细胞
• 转染
• SD大鼠 brain derived neurotrophic factor
• bone marrow stromal cells
• transfection
• SD rat

目的研究基因真核表达载体PcDNA3.1-BDNF的构建及其在骨髓基质细胞的转染和表达情况。方法以挪威大鼠BDNFcDNA为模板,PCR扩增BDNF全长编码基因,亚克隆至PcDNA3.1表达载体。将构建的重组质粒测序并通过脂质体转染到骨髓基质细胞中,RT-PCR鉴定BDNF基因的表达,Western blot检测BDNF蛋白的表达。结果 BDNF基因成功克隆到表达载体PcDNA3.1中,酶切鉴定片段为800bp,Western blot检测到BDNF在骨髓基质细胞呈阳性表达。结论真核表达载体构建成功,BDNF转染BMSCs后可稳定、高效表达。

• 单位
  中国医科大学附属第一医院; 中国医科大学附属盛京医院