基于“肝肾同源”理论探讨左、右归丸对TLR4/MyD88/NF-κB信号的影响及治疗骨性关节炎模型的作用机制研究

作者：金连峰; 顾炜^*; 孙富通; 马楠

来源：时珍国医国药, 2023, 34(03): 597-600.

• 左归丸
• 右归丸
• 骨关节炎
• TLR4/MyD88/NF-κB
• 信号通路

目的 利用细胞、分子生物学技术，采用实时荧光定量反转录聚合酶链反应(Real-time PCR,RT-PCR)、蛋白免疫印迹(Western Blot, WB)、酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay, Elisa)检测方法，观察左归丸组与右归丸对大鼠膝骨关节炎软骨细胞、韧带组织的作用机制及细胞凋亡的影响，并讨论左归丸组与右归丸治疗膝骨关节炎的作用机制。方法 SPF级8月龄Wistar雌、雄大鼠共40只，使用随机数字表法随机选取雌雄各4只作为正常组(A组),剩余大鼠用10%浓度木瓜蛋白酶溶液进行造模成功后作为膝骨关节炎模型组，将模型大鼠雌雄区别后再次随机分为4组，分别为模型组(B组)、左归丸组(C组)、右归丸组(D组)、硫酸氨基葡萄糖组(E组),连续治疗4周后于末次治疗后，对大鼠行腹主动脉取血，制备血清，取下部分大鼠的整体右膝关节及其余大鼠的膝关节软骨、韧带，HE染色方法观察大鼠膝关节软骨病理变化；对软骨、韧带共同使用RT-PCR法、WB法检测其MyD88、NF-κBp65的表达水平；ELISA法检测大鼠分离血清中TNF-α的含量。采用SPSS 22.0软件包对检测结果进行方差分析，P<0.05有统计学意义。结果 (1)膝关节病理切片结果：经左、右归丸治疗后KOA症状缓解。(2) RT-PCR检测结果：软骨和韧带组织中，较模型组对比左归丸组与右归丸组MyD88、NF-κBp65表达含量明显减少(P<0.05)。(3) Western Blot检测结果：软骨和韧带组织中，较模型组对比左归丸组与右归丸组MyD88、NF-κBp65蛋白含量明显降低(P<0.05)。(4)Elisa法检测结果：各组大鼠血清中，左归丸组与右归丸组TNF-α表达水平明显降低(P<0.05)。结论 左、右归丸还能通过补肾法抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路活化，降低MyD88、NF-κBp65、TNF-α的表达，达到保护软骨细胞及韧带组织，控制炎症，促进受损组织恢复的目的。

• 单位
  辽宁中医药大学附属医院; 辽宁中医药大学