科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
目的:探讨寻常型天疱疮(PV)患者血清对Ha CaT细胞桥粒芯蛋白(Dsg) 1、3和基质金属蛋白酶(MMP) 9表达的影响及其参与PV棘层松解的可能机制。方法:用含5%PV血清的高糖DMEM培养基孵育Ha Ca T细胞,以正常培养组、健康血清组以及抗Dsg3抗体组(阳性对照组)作为对照。刮取细胞提取总RNA及蛋白质,Q-PCR检测Dsg1、Dsg3和MMP-9 mRNA转录水平,Western Blot检测Dsg1、Dsg3和MMP-9表达,荧光单克隆Dsg1/3抗体分别检测细胞表面Dsg1、Dsg3表达。结果:Q-PCR结果显示:与正常培养组比较,含5%PV血清培养组Ha CaT细胞Dsg1、Dsg3、MMP-9基因的mRNA相对表达量分别上升约432%、402%、402%,而抗Dsg3抗体组分别上升约495%、488%、604%,PV血清组与正常培养组间有明显差异(P值均<0.05)。Western Blot结果显示:与正常培养组相比,PV血清组Ha CaT细胞表面Dsg1、Dsg3、MMP-9蛋白表达升高。Dsg1、Dsg3荧光单克隆抗体检测显示:PV血清组Ha CaT表面Dsg1线状荧光消失,替代为颗粒状、团块状荧光颗粒分散于细胞表面和胞浆区域,而细胞表面Dsg3线状荧光仍然存在,但强度减弱。结论:PV血清能促进Dsg1、Dsg3和MMP-9转录及表达,Dsg3抗体可通过诱导角质形成细胞Dsg1蛋白内吞,削弱抗体补偿作用参与棘层松解。
- 单位
