摘要
本实验旨在探讨甘氨脱氧胆酸(GDCA)对猪卵泡颗粒细胞状态和功能的影响,为后续研究GDCA对卵泡发育的影响提供一定的理论支持。利用猪卵泡颗粒细胞体外培养技术,在细胞对数生长期用不同浓度(0、50、100、200、400、800μmol/L)的GDCA处理,分别采用CCK-8、流式细胞术、酶联免疫吸附实验(ELISA)和荧光定量PCR等方法,检测GDCA对体外培养猪卵泡颗粒细胞增殖、凋亡和类固醇激素合成的影响。结果表明:随着添加GDCA浓度增加,颗粒细胞的增殖率呈下降趋势,而凋亡率呈上升趋势,浓度达到200μmol/L时与对照组相比差异显著;不同浓度GDCA处理组的颗粒细胞培养基中类固醇激素:雌激素(E2)、孕酮(PROG)含量无显著变化;细胞增殖(CyclinD1和CDK4)、凋亡(CASPASE3、CASPASE8、CASPASE9和BAX)和激素合成相关基因(3βHSD和CYP19A1)的表达量与细胞表型相符。以上结果表明,GDCA可诱导猪卵泡颗粒细胞凋亡,抑制其增殖,但对猪卵泡颗粒细胞类固醇激素合成无显著影响。
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单位广西大学; 河南牧业经济学院