冷冻保存对人精子膜蛋白PH-20和透明质酸酶活性的影响

作者：马晓萍; 高晓勤; 丁贤胜; 周桦

来源：解剖学杂志, 2016, 39(05): 561-615.

• 精子
• 冷冻保存
• PH-20
• 透明质酸酶

目的:探讨冷冻保存对人精子膜蛋白PH-20和顶体内透明质酸酶活性的影响。方法:24例正常生育力精液标本行冷冻保存。免疫印迹检测PH-20蛋白在人精子中的表达,免疫荧光观察PH-20蛋白在人精子上的定位,采用改良透明质酸钠-明胶底物膜法检测精子顶体内透明质酸酶(HYD)活性(HYD阳性反应率、HYD活性强度)。结果:免疫印迹显示正常标本冷冻前、后精子均有PH-20蛋白的表达,其PH-20/β-actin平均光密度在正常组冷冻前为0.41±0.15;正常组解冻后为0.24±0.11,两者的平均光密度差异有统计学意义;间接免疫荧光染色后在荧光显微镜下观察冷冻前PH-20阳性率达72.88%±8.04%;解冻后PH-20阳性率降至46.97%±8.38%,差异有统计学意义;解冻后HYD活性与冷冻前比较均有显著性下降。结论:冷冻-解冻过程可引起精子PH-20蛋白表达减少和精子PH-20阳性率降低,以及受精过程中的关键酶-HYD活性减弱。

• 单位
  贵州医科大学; 遵义医药高等专科学校; 六盘水市人民医院