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摘要
目的 制备与纯化心肌Kv7.1钾通道IQ1基序的蛋白，为研究钾离子通道蛋白片段与钙调蛋白(calmodulin,CaM)的相互作用做准备，为明确相关心血管疾病发病机制奠定基础。方法 采用基因重组技术，将IQ1基因片段插入pGEX-6p-1质粒，并将重组质粒转化入大肠杆菌，使其在大肠杆菌中诱导表达IQ1蛋白，再采用酶裂解、超声破碎法提取IQ1蛋白，使用SDS-PAGE电泳确认制备蛋白的浓度与纯度，Pull-down assay方法检测蛋白的结合能力。结果 本研究制备了较高浓度与纯度的心肌Kv7.1钾通道的IQ1蛋白，且在2mM的Ca2+浓度下，CaM与IQ1的结合可能呈浓度依赖性，说明制备的IQ1蛋白具有很好的结合能力。结论 采用基因重组技术与超声破碎方法能提取纯化心肌Kv7.1通道IQ1基序蛋白，并且浓度和结合能力均很好，可用来进一步的深入实验研究。
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