人抗HER2单链抗体/精氨酸九聚体融合蛋白的基因构建、表达及鉴定

作者：姜扩; 陈锐; 王立锋; 马琼; 孟艳玲; 杨安钢; 马保安; 裘秀春

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2011, (11): 1201-1203.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006200

• HER2
• 单链抗体
• 精氨酸九聚体
• 融合蛋白
• 靶向输送 HER2
• scFv
• oligo-9-arginine
• fusion protein
• targeted delivery

目的:构建人源性抗HER2单链抗体(scFv)/精氨酸九聚体(9R)融合蛋白基因,在大肠杆菌里表达纯化并检测该融合蛋白的活性。方法:采用PCR的方法,扩增融合基因scFv-9R,将获得的基因克隆入原核表达载体pQE30,在大肠杆菌M15中表达,表达产物经SDS-PAGE和Western blot鉴定,通过Ni-NTA螯合层析纯化,透析复性,超滤浓缩。ELISA分析scFv-9R融合蛋白抗原亲和活性,凝胶迁移实验检测scFv-9R融合蛋白与siRNA结合活性。结果:成功构建了人源性抗HER2 scFv-9R融合基因,经IPTG诱导后在M15中以包涵体形式表达。表达的目的蛋白scFv-9R能与HE...

• 单位
  第四军医大学