逆转录环介导等温扩增技术检测烟草环斑病毒的研究

作者：张吉红; 陈先锋; 孙辉

来源：植物病理学报, 2014, 44(06): 629-633.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.2014.06.009

• 烟草环斑病毒
• 环介导等温扩增
• 检测

本研究采用环介导等温扩增技术(Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),建立了一种快速、简便的烟草环斑病毒检测方法。根据TRSV外壳蛋白编码基因上的8个位点,共设计了6条引物,通过RT-LAMP扩增得到特征性的梯度条带。特异性试验表明,引物对TRSV的检测具有良好的特异性;灵敏度试验显示RT-LAMP比普通RT-PCR高10倍。通过反应温度和时间的优化,该方法只需在水浴锅中60℃等温扩增60 min,整个检测周期约1.5 h,结果采用SYBR green I染色显示,易于观察和判定。

• 单位
  宁波出入境检验检疫局