结核分枝杆菌38ku蛋白的制备及其抗原性研究

作者：周丽蓉; 徐敬华; 罗永艾; 王国治

来源：中国实用内科杂志, 2007, (24): 1955-1957.

• 分枝杆菌
• 结核
• 38ku蛋白
• 基因表达
• 抗原性
• 酶联免疫吸附试验 Mycobacterium
• tuberculosis
• 38 ku protein
• Gene expression
• Antigenicity
• Enzyme linked immunosorbent

目的基因克隆、表达、纯化结核分枝杆菌38ku蛋白,研究其抗原性,评价其在血清学诊断中的价值。方法2003年2月至2004年3月在中国药品生物制品检定所菌苗室以结核分枝杆菌H37Rv基因组DNA为模板,通过聚合酶链反应(PCR)方法对38ku蛋白基因进行扩增,以PET-30a(+)为载体构建重组质粒,在大肠埃希菌中表达38ku蛋白,通过金属离子螯合亲和层析方法纯化重组蛋白,免疫印迹和酶联免疫吸附试验(ELISA)方法分析该重组蛋白的抗原性。结果构建了具有正确基因序列的38ku蛋白重组质粒,在大肠埃希菌BL21(DE3)中以包涵体形式表达,经过一步金属离子螯合亲和层析后得到纯度为92.7%的目的蛋...

• 单位
  中国食品药品检定研究院; 重庆医科大学附属第一医院