流式细胞术优化MDCK细胞基因转染效率的研究

作者：王家敏; 王美皓; 马玉梅; 靳冬武; 赵彩红; 李自良; 乔自林; 马忠仁^*

来源：西北民族大学学报(自然科学版), 2020, 41(01): 16-20.

DOI：10.14084/j.cnki.cn62-1188/n.2020.01.004

• MDCK细胞
• 基因转染
• 脂质体
• 流式细胞术

为探究脂质体介导的MDCK细胞基因转染效率,并获得最佳的优化方案,本研究选取不同配比的质粒和脂质体浓度,将p-EGFP-C1质粒转入MDCK细胞。转染后36h,利用台盼蓝染色法检测细胞活率,流式细胞术检测细胞中增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的表达情况和转染效率,获得优化的转染条件。结果发现,转染后MDCK细胞,实验组细胞活力与阴性对照组差异不显著(P>0.05)。当质粒(μg)∶脂质体(μL)浓度配比为0.5∶1.0、0.5∶1.25、0.5∶1.5时,转染率达到了较高水平,分别为(23.4±3.4)%、(24.5±4.5)%、(25.2±3.7)%,从经济因素考虑,脂质体介导的MDCK细胞基因转染质粒(μg)与脂质体(μL)的最佳配比浓度为0.5∶1.0。这为MDCK细胞用于基因转染提供了一定的理论基础。

• 单位
  西北民族大学; 兰州百灵生物技术有限公司