摘要

目的探讨柚皮苷对兔骨髓基质细胞成骨分化、增殖和迁移及对OPG/RANKL信号的调节作用。方法选用2~3月龄新西兰大白兔提取兔骨髓基质细胞,用不同浓度(0~1000μM)的柚皮苷处理细胞48 h, CCK-8试剂盒测量细胞活力。后续采用柚皮苷(0、10、25、50μM)处理细胞48 h,碱性磷酸酶(ALP)活性测量试剂盒和茜素红S(ARS)染色确定细胞成骨分化能力;细胞划痕试验和结晶紫染色检测细胞的迁移能力;实时荧光定量-聚合酶链式反应(RT-PCR)法测量细胞中OPG、Runx2、OCN和RANKL mRNA水平;蛋白免疫印迹法测量细胞中OPG、Runx2、OCN和RANKL蛋白水平。结果与0μM组比较,10μM、25μM和50μM的柚皮苷对兔骨髓基质细胞活力并无影响。柚皮苷(25μM和50μM)组较0μM组兔骨髓基质细胞的ALP活性增强,且ARS染色增强。同时,柚皮苷10、25、50μM组细胞的迁移能力增强。柚皮苷处理组细胞中OPG、Runx2和OCN mRNA和蛋白水平明显上调,但柚皮苷处理组细胞中RANKL mRNA和蛋白水平明显下调。结论柚皮苷能促进兔骨髓基质细胞成骨分化和迁移,且可能与调节OPG/RANKL信号通路有关。

  • 单位
    广西中医药大学第一附属医院