抗CD52单克隆抗体外源DNA残留量检测方法的建立及验证

作者：赵祖波; 陈继军; 赵晓瑞; 乔玉玲; 秦海艳; 南建军; 熊颖; 毛晓燕

来源：中国生物制品学杂志, 2017, 30(12): 1305-1310.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.002030

• CD52
• 单克隆抗体
• CHO细胞
• 残余DNA
• 实时定量PCR
• 方法验证

目的建立检测抗CD52单克隆抗体原液中残余DNA的方法,并对该方法进行验证。方法利用CHO Host Cell DNA Extraction&Amplification Kit,采用qPCR法检测抗CD52单克隆抗体中宿主细胞残留DNA含量,并进行方法的专属性、线性、准确度、精密度和耐用性验证。结果该方法可以准确定量检测CHO细胞残留DNA含量。专属性验证试验中对照制剂无特异扩增曲线,而CHO细胞上清有明显的扩增曲线;5次试验中标准曲线相关系数R2均≥0.98,表明该方法线性良好;准确度验证试验中所有试验的加标回收率均在70%130%范围内;精密度验证试验中所有试验检测结果的相对标准偏差(RSD)均不大于30%;耐用性验证试验中,Proteinase K不同消化温度下检测结果的CV为0.85%,不同稀释倍数的供试品加标回收率在70%130%范围内,不同稀释倍数外源DNA检测结果CV为4.71%。结论该方法专属性、准确度、精密度、线性和耐用性均符合要求,可采用该试剂盒qPCR法检测外源DNA残留量。

• 单位
  兰州生物制品研究所有限责任公司