香烟烟雾提取物对外周血内皮祖细胞衰老的影响及其机制研究

作者：郑浩; 李占鲁; 孔旭钢; 沈啸华; 傅国胜

来源：心脑血管病防治, 2016, 16(05): 348-350.

• 香烟烟雾提取物
• 内皮祖细胞
• 衰老
• 端粒末端转移酶

目的观察香烟烟雾提取物(CSE)对外周血内皮祖细胞(EPC)衰老的影响,探讨其可能机制。方法密度梯度离心法获取人外周血单核细胞,培养4d后,收集贴壁细胞,分别加入2.5%,5%,10%和15%的CSE干预。采用SA-β-半乳糖苷酶染色试剂盒检测衰老细胞;MTT比色法检测EPC的增殖能力;端粒重复序列扩增法(TRAP)-ELISA定量检测EPC端粒末端转移酶活性;逆转录PCR法检测人端粒酶逆转录因子(human telomerase reverse transcriptase,h TERT)mRNA水平;Western蛋白印迹检测EPC Akt Ser473磷酸化水平。结果 CSE能显著增加SA-β-半乳糖苷酶阳性细胞数量,15%CSE影响最为明显,同时显著抑制EPC增殖能力;CSE能显著抑制端粒酶活性及h TERT mRNA表达;另外,CSE能抑制EPC Akt磷酸化。结论 CSE诱导EPC衰老,伴随EPC增殖能力的损害,提示细胞衰老也许是CSE影响EPC功能的机制之一;CSE诱导EPC衰老可能与抑制EPC端粒末端转移酶活性、减少h TERT mRNA表达及抑制Akt磷酸化有关。

• 单位
  浙江省杭州市下沙医院; 浙江大学医学院附属邵逸夫医院