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摘要
目的探讨Beclin-l基因与胰腺癌发生发展的关系。方法 (1)回顾性收集2009年4月至2009年11月期间四川大学华西医院行手术切除的胰腺癌标本25例及正常胰腺组织20例,采用实时荧光定量PCR和免疫组化染色方法分别检测胰腺癌组织及正常胰腺组织中Beclin-1 m RNA及其蛋白的表达水平,并分析胰腺癌组织中Beclin-1蛋白的表达水平与患者临床病理学特征之间的关系。(2)将PANC-1细胞分为2组,转染组细胞转染PLen O-WPI-Beclin-1重组慢病毒载体,未转染组细胞未进行重组慢病毒载体转染,分别于共培养24及48 h时采用PCR法检测Beclin-1 m RNA的表达水平。(3)将PANC-1细胞分为3组,转染组加入PLen O-WPI-Beclin-1重组慢病毒载体,空载体组加入PLen O-WPI载体,空白对照组未加入任何载体,各组细胞于培养1~7 d期间每天采用MTT法检测细胞增殖情况。结果 (1)人胰腺癌中Beclin-1 m RNA及其蛋白的表达水平均低于正常胰腺组织(P<0.05)。在胰腺癌患者中,Beclin-1蛋白的表达水平与患者的年龄、性别、肿瘤直径及分化程度均无关(P>0.05),而与TNM分期及淋巴结转移有关,TNMⅢ期和Ⅳ期患者的Beclin-1蛋白的表达水平低于Ⅰ期或Ⅱ期患者(P<0.05);淋巴结转移阳性患者的Beclin-1蛋白的表达水平低于阴性患者(P=0.011)。(2)转染24 h和48 h时,同时点转染组细胞中Beclin-1 m RNA的表达水平高于未转染组(P<0.05)。(3)MTT实验结果显示,转染1、2及3 d时,转染组、空载体组和空白对照组细胞的OD值比较差异均无统计学意义(P>0.05);从转染4 d开始,至转染7 d期间,同时点转染组细胞的OD值较空白对照组和空载体组均较低(P<0.05)。结论 Beclin-1基因及其蛋白在胰腺癌组织中的表达均下调,其可能是胰腺癌发生发展的原因之一。将Beclin-1基因导入PANC-1细胞后,细胞的增殖能力降低,提示Beclin-1基因可能是胰腺癌基因治疗的目标基因。
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单位四川大学华西医院
