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摘要
花粉类受体蛋白激酶（pollen receptor like kinase,PRK）是一类富LRR结构域的类受体蛋白激酶，不仅在花粉发育和植物受精中发挥作用，也在胁迫响应中发挥作用。基于对前期花生根尖铝胁迫转录组数据的分析，我们发现了在转录水平响应铝胁迫的花粉类受体蛋白激酶基因AhPRK4，为探究AhPRK4在花生铝胁迫中的功能，该文进一步分析了铝胁迫处理下AhPRK4在花生耐铝品种‘99-1507’和铝敏感品种‘中花2号’（‘ZH2’）根尖中的转录变化，通过序列分析、进化树构建等分析了AhPRK4的蛋白结构特点和亲缘关系，克隆了AhPRK4的胞内域序列（AhPRK4-CD），并通过原核表达和体外磷酸化体系分析了AhPRK4-CD的自磷酸化活性。结果表明：（1）不同铝处理时间及不同铝浓度处理后，AhPRK4的转录水平上调，显著响应铝处理，是铝诱导基因；（2）AhPRK4含有673个氨基酸，属于LRR-III蛋白激酶家族成员，具跨膜域和信号肽，且预测具有磷酸化活性位点；（3）体外诱导表达出约71 k D的可溶性蛋白（GST-AhPRK4-CD），经凝胶亲和层析纯化，得到基于蛋白印迹实验（Western Blot）验证正确的重组蛋白，重组蛋白可发生磷酸化修饰，但无明显的自磷酸化现象。综上认为，AhPRK4是一个铝胁迫应答基因，参与花生铝胁迫早期应答机制，且能发生磷酸化修饰。
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