柱前衍生化RP-HPLC法同时测定多肽类药物中7个生物胺的含量

作者：陈小英; 王嫦鹤; 刘雪峰; 刘海静^*

来源：药物分析杂志, 2022, 42(04): 643-652.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2022.04.11

• 生物胺
• 柱前衍生化
• 反相高效液相色谱法
• 多肽药物
• 注射用胸腺肽
• 骨肽注射液
• 转移因子口服液
• 丹磺酰氯

目的:建立柱前衍生化RP-HPLC法测定注射用胸腺肽、骨肽注射液、鲑降钙素注射液、注射用谷胱甘肽、转移因子口服液和转移因子胶囊中色胺、2-苯乙胺、腐胺、尸胺、组胺、酪胺、亚精胺7个生物胺含量。方法:样品经0.1mol·L-1盐酸溶液溶解，以丹磺酰氯为衍生化试剂，用反相高效液相色谱法测定。采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm, 5μm),以含0.1%醋酸的0.01 mol·L-1醋酸铵溶液(A)-乙腈(B)为流动相，梯度洗脱(0～21 min, 70%A→50%A;21～25 min, 50%A→30%A;25～60 min, 30%A;60～70 min, 30%A→70%A),流速1.0 mL·min-1,检测波长254 nm,柱温35℃。结果:色胺、2-苯乙胺、尸胺、酪胺和亚精胺的线性范围均为0.1～50 mg·L-1(r>0.999),腐胺的线性范围为0.06～31.91 mg·L-1(r>0.999),组胺的线性范围为0.10～26.12 mg·L-1(r>0.999);平均回收率在73.6%～104.0%。注射用胸腺肽检出的生物胺种类和含量最高，转移因子制剂其次，骨肽注射液中只检出组胺，鲑降钙素注射液和注射用谷胱甘肽均未检出生物胺。注射用胸腺肽检出腐胺、尸胺、组胺、酪胺和亚精胺。其中，注射用胸腺肽A企业样品中组胺和腐胺含量较高，分别约为0.113%、0.159%;B企业样品中尸胺、酪胺和亚精胺含量较高，分别约为0.373%、0.363%和0.090%;转移因子口服液和转移因子胶囊检出有腐胺、尸胺、酪胺和亚精胺。结论:该方法准确可靠，灵敏度高，重复性好，易于操作，可用于多肽类药物中生物胺的检测。

• 单位
  陕西中医药大学