摘要
为了制备高效价和多动物适用性的抑制素α (inhibin α, INH-α)多克隆抗体,通过生物信息学分析INH-α物种同源保守性,并以pET-32α为骨架,构建INH-α和INH-α-Ferritin表达载体,原核表达纯化后的重组蛋白用于免疫日本大耳兔,采用间接ELISA方法测定兔血清中抗体效价。结果表明,本研究成功构建了 INH-α和INH-α-Ferritin原核表达载体,在0.4 mmol/L的IPTG,37 ℃诱导6 h 的条件下,分别获得了35 kDa和50 kDa包涵体形式的重组蛋白。通过免疫获得了高效价的兔抗多克隆抗体,INH-α-Ferritin 抗血清效价达到1:19 531 250。生物信息学分析结果显示INH-α在哺乳动物间的同源性高、保守性强。本研究成功构建 INH-α和INH-α-Ferritin原核表达载体,并通过INH-α-Ferritin 显著提高多克隆抗体的效价,为提高哺乳动物家畜繁殖力的研究奠定基础。
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