流行性乙型脑炎prM蛋白剪切位点突变的prM-E蛋白表达细胞系的建立

作者：李业南; 陈振师; 步志高; 华荣虹

来源：中国预防兽医学报, 2013, (03): 189-192+201.

• 流行性乙型脑炎病毒
• prM蛋白
• 蛋白剪切
• 细胞系 Japanese encephalitis virus
• prM protein
• protein cleavage
• cell line

为建立稳定共表达乙型脑炎病毒(JEV)完整M前体蛋白(prM)和E蛋白的BHK-21细胞系,本研究在prM蛋白furin蛋白酶剪切位点编码基因中引入突变,将突变后的prM基因克隆于质粒中构建重组表达质粒pCAG-JEV-prM(R89A)E。将重组质粒转染BHK-21细胞,转染48 h后细胞用含G418的选择性培养基选择培养,进一步经细胞克隆纯化制备表达剪切位点突变的JEV prM-E蛋白的稳定细胞系。经IFA和western blot鉴定表明,该细胞系能表达JEV prM与E蛋白,所表达的prM蛋白未发生剪切;细胞经多次传代后仍能够稳定地共表达prM与E蛋白。该细胞系的建立为研究prM蛋白剪...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室