miR-21/PTEN/Akt参与白藜芦醇促EPC的体外成血管能力

作者:刘晓飞; 武振东; 李兰兰; 贺燕婷; 张耀文; 李振凤; 官秀梅; 李宏*; 成敏
来源:中国动脉硬化杂志, 2021, 29(01): 48-53.

摘要

目的探讨miR-21及其下游PTEN/Akt信号通路在白藜芦醇促进大鼠骨髓源性内皮祖细胞(EPC)体外成血管能力中的作用。方法采用密度梯度离心法分离大鼠四肢骨髓的单个核细胞,培养于含10%胎牛血清的EGM-2MV完全培养基中诱导分化成EPC,实验用3~5代的EPC。白藜芦醇(20μmol/L)干预12 h后,采用Matrigel胶检测EPC的体外成血管能力;实时荧光定量PCR检测miR-21及PTEN基因的表达情况;干扰miR-21表达后检测EPC的体外成血管能力;双荧光素酶报告基因检测miR-21对PTEN的靶向调控;Western blot检测PTEN蛋白表达情况以及Akt磷酸化水平。结果白藜芦醇(20μmol/L)明显促进EPC的体外成血管能力(P<0.05),抑制了miR-21(P<0.01)的表达,然而却促进了miR-21下游靶基因PTEN的基因(P<0.01)及蛋白表达(P<0.05),进而抑制PTEN下游信号分子Akt的磷酸化水平。双荧光素酶报告基因检测结果显示,miR-21可与PTEN mRNA的3′UTR靶向结合(P<0.01)。结论 miR-21调控了白藜芦醇促EPC的体外成血管能力,其机制可能是通过PTEN/Akt信号通路来发挥的,该研究结果揭示了白藜芦醇调控EPC功能一种新的细胞内信号机制。