周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶/半胱氨酸蛋白酶抑制剂复合基因真核重组质粒的构建与表达

作者：刘晓骏; 郭晓峰; 张赛楠; 陆施娟; 方浩; 徐邦生; 方政

来源：中华地方病学杂志, 2011, (04): 371-375.

• 丝虫
• 马来
• 甘油醛-3-磷酸脱氢酶类
• 半胱氨酸蛋门酶抑制剂
• 重组
• 遗传
• HeLa细胞 Brugia malayi
• Glyceraldehydes-3-phosphate dehydrogenases
• Cysteine proteinase inhibitors
• Recombination
• genetic
• HeLa cells

目的构建周期型马来丝虫3-磷酸甘油醛脱氢酶/半胱氨酸蛋白酶抑制剂(GAPDH/CPI)复合基因真核重组表达质粒,为研制复合多价疫苗奠定基础。方法依据GenBank中BmGAPDH及BmCPI基因序列设计引物,以周期型马来丝虫总RNA为模板,RT-PCR扩增目的编码基因。PCR产物经TA克隆后,克隆至载体pGEM-T Easy中。取阳性重组质粒pGEM-T/BmGAPDH和pGEM-T/BmCPI以及真核重组表达载体分别双酶切,将酶切后的载体和目的片段进行连接,构建真核重组表达质粒pcDNA3.1(+)/BmGAPDH/BmCPI。将复合基因重组质粒瞬时转染入HeLa细胞后,进行RT-PCR验证...

• 单位
  南通大学