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摘要
目的研究探讨甲状旁腺激素相关蛋白(PTHrP)、单羧酸转运泵家族1(MCT1)信号通路对非小细胞肺癌衰老的调节机制。方法将2014年5月—2018年5月在该医院培养的80孔非小细胞肺癌A549细胞分为A、B、C、D共4组,每组20孔。其中A组细胞中加入PTHrP信号通路抑制剂、B组细胞加入MCT1信号通路抑制剂、C组细胞加入PTHrP信号通路激活剂、D组细胞加入等量的PBS培养液,4组细胞经联系72 h培养。采用β-半乳糖苷酶染色法(β-Gal)观察4组细胞的衰老程度。对4组细胞进行PCR扩增,以实时荧光定量PCR方法检测PTHrP mRNA、MCT1mRNA的表达量。并对各组细胞中pHi染色小体的和细胞外乳酸水平进行检测比较。并采用Pearson检验对各指标间进行相关性分析。结果①4组细胞间β-Gal染色阳性率比较差异有统计学意义(P<0.05),其中A组、B组阳性率(13.98±2.53)%、(14.23±3.21)%均高于D组(10.09±2.98)%,C组阳性率(8.29±2.10)%则低于D组,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。②4组细胞的PTHrP mRNA、MCT1 mRNA表达量比较差异有统计学意义(P<0.05),其中A组、B组PTHrP mRNA、MCT1 mRNA表达量[(7.09±1.53)、(5.29±1.22);(7.26±1.61)、(4.98±1.17)]低于D组[(9.13±1.98)、(7.19±1.68)],而C组表达率[(12.32±2.09)、(9.57±1.98)]则高于D组,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。③4组细胞的p Hi染色小体的和细胞外乳酸水平比较有统计学差异,A组、B组pHi染色小体水平高于D组,C组则低于D组,A组、B组细胞外乳酸水平低于D组,C组则高于D组,各组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。④Pearson相关性检验显示,各组细胞的β-Gal染色阳性率(即衰老程度)与PTHrP mRNA、MCT1 mRNA表达量呈负相关性,与pHi染色小体水平呈正相关性,与细胞外乳酸水平呈负相关性(P<0.05)。结论 PTHrP、MCT1信号通路状态可以对非小细胞肺癌细胞的衰老起到调节作用,PTHrP、MCT1间相互影响,共同调节肺癌细胞的乳酸转运过程。
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单位深圳市人民医院; 自贡市第三人民医院
