摘要
目的:探讨miR-203对人舌鳞癌细胞系Tca8113增殖能力的影响。方法:通过慢病毒转染技术构建miR-203过表达的舌鳞癌细胞模型。RT-PCR法检测miR-203过表达慢病毒转染前后miR-203的表达水平;MTT方法检测miR-203过表达(micro up组)及阴性对照(NC组)2组细胞的增殖能力,连续检测5d,酶标仪检测A490值,绘制细胞增殖曲线;PI-FACS细胞周期检测miR-203过表达后对DNA合成和细胞周期的影响,取处于对数生长期的细胞,70%乙醇固定>1h,细胞染色,流式细胞仪检测。结果:成功建立了miR-203过表达舌鳞癌细胞模型。定量PCR结果显示,Tca8113细胞中,micro up组miR-203表达丰度是NC组的286.262倍,t=-34.879,P=0.001。MTT检测结果表明,与NC组相比,micro up组细胞增殖能力明显降低;检测第4天micro up组A490值为0.492±0.011,NC组为0.681±0.009,t=-23.463,P<0.001。PI-FACS细胞周期检测结果显示,micro up组DNA合成前期(G1期)细胞所占百分率为(58.98±0.56)%,较NC组的(53.86±0.96)%明显增高,t=-7.989,P=0.001;而DNA合成期(S期)、合成后期(G2期)及有丝分裂期(M期)细胞所占百分率降低。结论:miR-203可能通过将细胞周期阻滞于G1期,从而抑制舌鳞癌细胞系Tca8113的细胞增殖能力。
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单位首都医科大学附属北京同仁医院