Sertoli细胞对同种异体调节性T细胞/辅助性T细胞17分化平衡的调节作用

作者：陈莲一; 谢林

来源：华中科技大学学报(医学版), 2014, 43(06): 626-630+635.

• Sertoli细胞
• 免疫耐受
• 调节性T细胞
• 辅助性T细胞17

目的研究Sertoli细胞对同种异体免疫反应过程中调节性T细胞(Treg)/辅助性T细胞17(Th17)平衡的影响。方法体外分离并培养Sertoli细胞、T淋巴细胞和骨髓来源的DC细胞,将Sertoli、DC细胞分别与同种异体T细胞混合培养,光镜及电镜下观察Sertoli细胞形态,采用Western blot检测Sertoli细胞中人类主要组织相容性复合体(MHC)-Ⅱ、B7-H1蛋白的表达,收集培养上清液,采用酶联免疫吸附实验(ELISA)法检测Sertoli细胞培养上清内的转化生长因子(TGF)-β1、IL-17A等细胞因子水平;流式细胞术观察混合培养细胞分化结果。结果成功在体外培养Sertoli细胞;Western blot结果显示,Sertoli细胞与同种异体Nave CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD25-)在体外混合培养时,其表面的MHC-Ⅱ类分子和B7-H1分子的表达量增加;ELISA结果显示,与同种异体Nave CD4+T细胞混合培养72h后,培养上清液中的TGF-β1浓度较单纯Sertoli培养组显著升高[(823.10±59.07)pg/mL vs.(174.89±23.51)pg/mL,P<0.01];流式细胞术结果显示,与同种异体Sertoli细胞共同培养的体系内,Nave CD4+T细胞(CD4+CD62L+CD25-)被诱导分化为CD25+Foxp3+Treg细胞的比例显著增加,从<1.0%增长至27.6%;用Sertoli细胞与Treg细胞混合培养上清液孵育DC细胞/Nave CD4+T细胞,可明显减少培养液中IL-17A的浓度,使其从(361.58±80.27)pg/mL降低至(137.54±52.19)pg/mL(P<0.05);同时IL-17A+T细胞亚群百分比也显著降低(27.2%降至17.9%)。结论Sertoli细胞体外培养产生的抗炎细胞因子和免疫抑制细胞因子能诱导Nave CD4+T细胞分化为CD25+Foxp3+Treg细胞,Sertoli细胞可能通过调节同种异体Treg/Th17分化平衡,诱导免疫耐受。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属同济医院; 器官移植教育部重点实验室; 湖北省医学会