摘要
试验旨在建立一种快速检测牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病的多重PCR方法。根据布鲁氏菌IS711拷贝数的差异和基因序列上的缺失序列设计4对引物,优化多重PCR反应体系和反应条件,分析了PCR的特异性、灵敏度、稳定性。建立的多重PCR方法对牛、羊、猪、犬布鲁氏菌均能扩增出预期片段,扩增片段大小分别为494、732、591、272bp。牛、羊、猪、犬布鲁氏菌的灵敏度分别为1.1×102、5.1×102、3.5×102、2.5×102 CFU/mL。初步应用该方法检测人工模拟的牛奶样品,灵敏度能达到1.0×103 CFU/mL。本试验建立的多重PCR检测方法简单、快速、灵敏度高,具有很好的应用前景,对牛、羊、猪、犬布鲁氏菌病的鉴定具有重要意义。
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单位军事医学科学院军事兽医研究所