摘要
为提高纤维素酶产量,以匍枝根霉TP-02为出发菌株,通过诱变选育纤维素酶高产突变株,并研究碳源、氮源以及氨基酸等物质对菌株产酶能力的影响.经紫外和甲基磺酸乙酯复合诱变后筛选得到一株高产菌株TZ-03,其滤纸酶活(FPA)为4.96IU/mL,较TP-02提高了37.8%.优化后最佳发酵培养基为:微晶纤维素20g/L,鱼粉蛋白胨10g/L,麸皮浸出汁2.5%,CaCl22g/L,MgSO4·7H2O 4g/L,KH2PO43g/L,谷氨酰胺1g/L,PEG-4000 0.25g/L,Tween 80 200μL/L,微量元素液1mL/L.此条件下TZ-03的FPA酶活高达11.58IU/mL.通过对发酵过程中溶氧、pH和补料条件的控制,进行10L发酵罐放大实验,最终使该突变株的FPA酶活在84h达到峰值21.32IU/mL,与摇瓶发酵相比提高了89.8%.β-葡萄糖苷酶(BG)、内切酶(EG)和外切酶(CBH)的酶活峰值分别为41.0IU/mL、26.76IU/mL和16.94IU/mL.通过诱变及发酵优化成功提高了纤维素酶产量,为纤维素酶的工业化应用奠定了一定的基础.
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