斜率比法测定水蛭抗凝血活性的方法学验证研究

作者：肖斯婷; 胡宇驰; 杨文良^*; 李韦然; 郭玉东; 许华玉; 李波^*

来源：药物分析杂志, 2023, 43(03): 405-413.

DOI：10.16155/j.0254-1793.2023.03.06

• 水蛭
• 斜率比法
• 活化的部分凝血活酶时间
• 抗凝血活性
• 方法学验证
• 专属性
• 准确性
• 精密度
• 量化测定
• 质量控制

目的:进行斜率比法测定水蛭抗凝血活性的实验室内方法学验证研究。考察斜率比法测定水蛭抗凝血活性作为质量控制方法的可行性。方法:选用7批蚂蝗和日本医蛭饮片，分别用蚂蝗对照药材和菲牛蛭对照药材，平行制备不同浓度浸提液，测定活化的部分凝血活酶时间(APTT)后用斜率比法测定抗凝血活性。在实验室内进行专属性、线性与范围、精密度、准确度、耐用性等多个方面的系统考察。结果:使用斜率比法测定水蛭抗凝血活性，专属性考察：该条件下土鳖虫不显示其抗凝血活性，水蛭浸提液100℃加热后活性降低，添加低分子肝素后试验不成立，用蚂蝗对照药材做对照测定日本医蛭抗凝血活性则试验不成立，说明本法的专属性和选择性较好。准确度考察：采用蚂蝗对照药材和菲牛蛭对照药材，64%、80%、100%、125%和156%的5个相对水平值测定值的相对偏差均<±20%,效价理论值对数(横坐标)和对应的效价测定值对数(纵坐标)呈现明显的直线关系，相关系数>0.95,斜率在0.95～1.05,说明方法的准确度较好。精密度考察：各相对效价水平的几何变异系数(GCV,%)均<20%;采用多批次的饮片测定RSD均<20%,说明本法的精密度较好。线性与范围考察：本法在相对于对照药材的在64%～156%,都能够进行准确测定，线性范围符合要求。耐用性考察：水蛭浸提液可放置24 h、37℃加热1 h后活性均未见改变，说明本法耐用性较好。结论:斜率比法测定水蛭抗凝血活性具有较好的精密度、准确度和重现性，量化测定水蛭抗凝血活性的生物检定方法，适用于水蛭的质量控制。

• 单位
  中国食品药品检定研究院; 国家药典委员会