摘要
试验旨在研究体外培养液中添加灭多威(methomyl,MET)对牛卵母细胞质量的影响。通过免疫荧光染色和实时荧光定量PCR等方法检测牛卵母细胞的卵丘细胞扩展程度、第一极体排出率、活性氧(reactive oxygen species,ROS)水平、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平、线粒体膜电位(ΔΨm)以及凋亡相关基因的表达进行评价。结果显示,不同浓度MET不影响卵丘细胞的扩展程度,但200μmol/L MET处理组卵母细胞的第一极体排出率显著低于对照组(P<0.05)。与对照组相比,200μmol/L MET处理组的卵母细胞ROS水平显著升高,GSH水平、线粒体膜电位(ΔΨm)均显著降低(P<0.05)。此外,本研究还发现,200μmol/L MET处理组卵母细胞中促凋亡基因Caspase-3和Bax的mRNA转录水平显著升高,抗凋亡基因Bcl-xl的mRNA转录水平显著降低(P<0.05)。上述结果表明,MET可以通过增加氧化应激和细胞凋亡来降低体外培养牛卵母细胞的质量。
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