乌头碱对培养新生大鼠心室肌细胞Connexin43蛋白磷酸化的影响

作者：章诗伟; 任杰林; 张黎; 李强; 刘艳; 刘良

来源：中国法医学杂志, 2008, (02): 92-95+146.

DOI：10.13618/j.issn.1001-5728.2008.02.008

• 法医毒理学
• 细胞培养
• 乌头碱
• Connexin43
• 蛋白质磷酸化

目的建立细胞水平的染毒模型,观察乌头碱对心肌细胞缝隙连接蛋白Connexin43(Cx43)的影响。方法实验分0.25、0.5、0.75、1.0、1.5和2.0μmol/L等6个不同浓度乌头碱染毒组,运用蛋白印迹法和免疫荧光技术,检测各组及对照组心肌细胞Cx43蛋白磷酸化状态的改变。结果蛋白印迹检测显示,不同浓度染毒组心肌细胞中Cx43蛋白总量与正常对照组无显著差异;0.5μmol/L乌头碱染毒后,Cx43开始出现脱磷酸化;当染毒浓度达到1.0μmol/L后,Cx43脱磷酸化显著,且1.5及2.0μmol/L染毒效果和1.0μmol/L染毒组相当。免疫荧光分析结果提示乌头碱作用后,心肌细胞Cx43蛋白在羧基端第368位点丝氨酸残基(Ser368)发生明显的脱磷酸化。结论一定浓度的乌头碱能诱导心肌细胞缝隙连接蛋白Cx43发生显著脱磷酸化。

• 单位
  湖北省中山医院; 华中科技大学同济医学院