摘要
目的 评价白藜芦醇对脓毒症急性肾损伤大鼠肾小管上皮细胞线粒体功能的影响。方法 健康SD大鼠96只,雌雄不拘,5~7周龄,体重180~220 g ,采用随机数字表法分为4组(n=24):假手术组(Sham组)、脓毒症组(Sep组)、脓毒症+溶媒组(Sep+V组)和脓毒症+白藜芦醇组(Sep+R组)。采用盲肠结扎穿孔(CLP)法制备脓毒症模型。于CLP后6、12、18 h时,Sep组、Sep+V组和Sep+R组分别腹腔注射生理盐水0.5 ml、溶媒0.5 ml、白藜芦醇10 mg/kg。于CLP后24 h时,测定血清Cr和BUN浓度;取肾组织,观察病理学结果,行肾小管损伤评分;分离纯化肾小管上皮细胞,采用JC-1荧光探针联合流式细胞仪分析技术检测线粒体跨膜电位,采用生物素-生物素酶发光技术测定细胞ATP含量,采用钙黄绿素-氯化钴技术联合流式细胞仪测定线粒体通透性转换孔开放的程度,采用过氧化物与亚铁离子的氧化还原反应直接测定细胞内过氧化脂质(LPO)含量,采用溶酶体摄取吖叮橙技术联合流式细胞仪测定溶酶体膜通透性。结果 与Sham组比较,Sep组和Sep+V组血清Cr和BUN浓度、肾小管损伤评分、肾小管上皮细胞线粒体通透性转换孔开放的程度、LPO含量和溶酶体膜通透性升高,线粒体跨膜电位和ATP含量降低(P<0.01)。与Sep组和Sep+V组比较,Sep+R组血清Cr和BUN浓度、肾小管损伤评分、肾小管上皮细胞线粒体通透性转换孔开放的程度、LPO含量和溶酶体膜通透性降低,线粒体跨膜电位和ATP含量升高(P<0.05)。结论 白藜芦醇可改善脓毒症大鼠肾小管上皮细胞线粒体功能,减轻急性肾损伤,机制可能与抑制氧化应激,降低溶酶体膜通透性有关。
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单位福建医科大学附属第一医院