液相色谱串联质谱法测定人体血清中的类固醇激素

作者：黄和飞; 谷叶; 李佳兴; 夏跃莲; 何水兰; 代秋琼; 吕小波^*

来源：药学与临床研究, 2022, 30(04): 300-304.

DOI：10.13664/j.cnki.pcr.2022.04.021

• 类固醇激素
• 血清
• 高效液相色谱串联质谱

目的： 建立一种能同时测定血清中 6 种类固醇激素 [包括孕酮 (P)、17-羟基孕酮(17-OHP)、皮质醇(COL)、去氢表雄酮(DHEA)、双氢睾酮(DHT)、硫酸去氢表雄酮(DHEAS)]的快速、灵敏的高效液相色谱串联质谱(HPLC-MS/MS)方法。 方法：血清样本经甲基叔丁基醚液液萃取，高速离心后上清液氮气吹干，加入复溶液后上机检测。 采用安捷伦 C18(100 mm × 2.1 mm,1.8 μm)色谱柱进行分离，水相 A 为纯水，有机相 B 为纯甲醇，质谱采用电喷雾电离(ESI)模式进行离子化，多反应监测模式(MRM)扫描，同位素稀释法进行定量分析。结果：血清中 6 个类固醇激素检测限(LOD，以信噪比(S/N)≥3 为标准)为 0.03～1.25 ng·mL-1；定量限(LOQ，以信噪比(S/N)≥10为标准)为 0.05～2.50ng·mL-1；在 0.05～4000 ng·mL-1范围内线性关系良好，相关系数(r)≥0.9950；低浓度样本日内精密度为 2.4%～6.2%；中浓度样本日内精密度为 2.3%～5.7%；高浓度样本日内精密度为 1.3%～5.4%。 低浓度样本日间精密度为 0.4%～2.6%；中浓度样本日间精密度为 0.3%～3.9%；高浓度样本日间精密度为 0.2%～4.7%。 加标回收率为 86%～106%。 结论：建立一种能同时测定血清中 6 个类固醇激素的 HPLC-MS/MS 方法。 该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强，可在 6.5 min 之内完成分离和检测，适用于人体血清中多种类固醇激素含量的定量分析。

• 单位
  昆明和合医学检验所有限公司