M13-IN5重组噬菌体对沙眼衣原体抑制作用机制探索

作者：王江懿; 尤聪; 赵乐然; 王梅; 魏世娟; 练婷婷; 邵丽丽; 刘全忠

来源：中国皮肤性病学杂志, 2022, 1-10.

DOI：10.13735/j.cjdv.1001-7089.202111071

• 沙眼衣原体
• M13噬菌体
• IN5
• 青霉素

目的 探索重组M13-IN5噬菌体抑制沙眼衣原体（Chlamydiatrachomatis，Ct）生长作用的机制。方法通过噬菌斑法测定M13-IN5噬菌体的滴度；CCK-8法检测M13-IN5噬菌体和青霉素对HeLa细胞的毒性作用；将不同滴度的M13-IN5噬菌体与50U/mL的青霉素作用于沙眼衣原体后，通过免疫荧光计数包涵体数量；将滴度为10~(7)pfu/mLM13-IN5噬菌体与50U/mL的青霉素作用于沙眼衣原体后进行子代感染力实验；采用定量逆转录PCR检测两组干预后CT＿046、CT＿111、CT＿395、CT＿443、CT＿666、CT＿823基因的转录变化，未干预沙眼衣原体感染组为阳性对照。两样本均数间比较采用t检验，多组样本均数间比较采用单因素ANOVA方法，多个样本间两两比较采用Bonferroni校正。结果滴度≤10~(9)pfu/mL的M13-IN5噬菌体以及50U/mL的青霉素对HeLa细胞无毒性作用，10~(7)pfu/mLM13-IN5噬菌体与50U/mL青霉素干预后，48h形成的包涵体数量无明显区别，抑制率分别为19.62%、21.09%(P>0.05)；M13-IN5噬菌体组干预形成的子代包涵体数量较青霉素干预组减少20.26%(P<0.05)。CT＿046、CT＿443在两个干预组转录水平均下降，M13-IN5噬菌体组较青霉素组下降明显(P<0.05)；M13-IN5噬菌体干预组CT＿666转录水平下降(P<0.05)，青霉素干预组无变化(P>0.05)；青霉素干预组压力应答基因CT＿111、CT＿395、CT＿823转录水平增高(P<0.05)，M13-IN5噬菌体干预组以上基因转录水平无变化(P>0.05)。结论 重组M13-IN5噬菌体对沙眼衣原体的抑制作用强于青霉素，CT＿046、CT＿443、CT＿666基因是重组噬菌体抑制沙眼衣原体生长的作用靶点。

• 单位
  天津医科大学总医院