双胞胎儿童牙菌斑宏基因组文库构建

作者：谢灵芝; 陈泳杏; 李宇红; 陆剑; 相艳; 杜民权

来源：口腔医学研究, 2014, 30(09): 861-864.

DOI：10.13701/j.cnki.kqyxyj.2014.09.014

• 牙菌斑
• 双胞胎儿童
• 宏基因组文库

目的:摸索构建口腔牙菌斑宏基因组文库的条件,为从口腔牙菌斑基因组中筛选耐酸基因奠定基础。方法:采用改进的SDS方法提取牙菌斑总DNA,用BamHI限制性内切酶部分酶切基因组DNA,以质粒pUC18为载体,转入大肠杆菌DH5α中。结果:最终构建了1对双胞胎儿童的两个宏基因组文库,文库白斑率达到90%,两个文库的克隆子均在1000个左右,文库质量检测重组率达到85.5%,插入片段大小集中在1.510kb之间。结论:从文库的白斑率、重组率和插入片段大小可以看出文库的质量较好,这为后续从文库中筛选新的耐酸基因奠定了良好的基础。

• 单位
  广州医科大学附属口腔医院; 武汉大学口腔医院; 厦门市口腔医院; 咸宁市中心医院