siRNA基因沉默ASIC1a对过敏性紫癜(HSP)患儿血清IgA1诱导的血管内皮细胞损伤的保护作用

作者：闫波; 袁丽萍^*; 张琴; 华冉; 李玉飞; 戴寒晶

来源：赣南医学院学报, 2019, 39(04): 331-336.

• 过敏性紫癜
• 血管内皮细胞
• ASIC1a

目的:探讨siRNA基因沉默ASIC1a对过敏性紫癜患儿血清Ig A1诱导的血管内皮细胞的保护作用。方法:体外培养人正常皮肤微血管内皮细胞(HDMVEC),设计针对人ASIC1a基因编码区的siRNA序列,构建重组慢病毒LV-sh-ASIC1a转染给HDMVEC细胞,设立空病毒转染对照组(NC组)、LV-h-ASIC1a转染组(si-ASIC1a组),采用RT-PCR检测转入基因ASIC1a的表达。病毒转染72 h后,加入分离的过敏性紫癜患儿血清Ig A1(HSP Ig A1)和正常患儿血清Ig A1,采用ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α、IL-8水平,real-time PCR和Western blotting分别检测细胞内ASIC1a、细胞骨架蛋白(SM-α、Destrin、Vinculin、ML-CK) mRNA及蛋白表达水平。结果:与NC对照组比较,si-ASIC1a组HDMVEC内TNF-α、IL-8的分泌显著减少,细胞骨架蛋白SM-α、Destrin、Vinculin、ML-CK mRNA和蛋白表达明显增加,差异有统计学意义(P <0. 01)。结论:沉默ASIC1a可以显著抑制HSP血管内皮细胞细胞骨架蛋白的下调,改善血管内皮细胞损伤。

• 单位
  安徽医学高等专科学校; 安徽医科大学第一附属医院