表达超抗原葡萄球菌肠毒素A的喉癌细胞的建立

作者：吉晓滨; 吕景礼; 刘启才; 谢景华

来源：临床耳鼻咽喉头颈外科杂志, 2013, (07): 376-378+381.

DOI：10.13201/j.issn.1001-1781.2013.07.003

• 超抗原
• 葡萄球菌肠毒素A
• 真核载体
• 基因克隆
• 喉肿瘤 superantigen
• staphylococcal enterotoxin A
• eukaryotic vector
• gene cloning
• laryngeal neoplasm

目的:构建葡萄球菌肠毒素A(SEA)基因真核表达载体并建立其稳定表达的喉癌细胞系。方法:根据标准葡萄球菌菌株ATCC13565中SEA基因序列,人工合成其编码区序列,然后亚克隆至真核表达载体pIRES2-EGFP,构建pSEA-IRES-EGFP重组质粒,再将重组质粒转染至喉癌Hep-2细胞,G418筛选获得抗性单克隆,用RT-PCR和ELISA法鉴定SEA在喉癌细胞中的表达。结果:合成的SEA基因亚克隆至真核表达载体pires-EGFP后,测序证实克隆的SEA序列与GenBank中标准葡萄球菌菌株ATCC13565的编码区序列完全一致;重组质粒转染喉癌Hep-2细胞后,经筛选2周获得抗性单克...

• 单位
  广州市第一人民医院; 广州医科大学