抗猫细小病毒嵌合抗体基因在昆虫细胞中的表达与鉴定

作者：薛雨佳; 宋彩玲; 赵爽爽; 李彤彤; 王文静; 张云; 刘明^*

来源：中国预防兽医学报, 2019, 41(06): 632-636.

• 基因工程嵌合抗体
• 猫细小病毒
• 昆虫杆状病毒表达系统

为降低单克隆抗体(MAb)在犬体内的免疫原性,本研究克隆了具有中和猫、犬细小病毒(FPV、CPV)活性的MAb (3EB)的轻、重链可变区基因及犬天然抗体(NAb)轻、重链恒定区基因,通过融合PCR获得鼠-犬嵌合抗体基因。构建能够表达嵌合抗体的重组质粒,经昆虫杆状病毒表达系统对重组嵌合抗体进行表达。SDS-PAGE和western blot试验显示鼠-犬嵌合抗体重链为55 ku、轻链为25 ku。间接免疫荧光试验显示该嵌合抗体能够与抗犬IgG和FPV特异性结合。上述结果表明,嵌合抗体保留了原MAb 3EB对病毒特异结合能力的基础上,将鼠源恒定区替换为犬源NAb的恒定区。病毒中和试验表明嵌合抗体保留了3EB对FPV、CPV的中和活性。本研究首次通过昆虫杆状病毒表达系统表达了抗FPV、CPV的嵌合抗体,降低了原MAb的免疫原性,对FPV、CPV病临床治疗用抗体药物的研制具有重要指导意义。

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室