miR-377-5p通过下调HIF-1α及其相关VEGF信号通路抑制肝细胞癌HepG2细胞的增殖和侵袭

作者：杨晋; 贺凯; 张孟瑜; 吴力乐; 秦蜀; 冯春红; 罗鸣; 夏先明^*

来源：中国肿瘤生物治疗杂志, 2020, 27(03): 248-254.

• miR-377-5p
• 缺氧诱导因子-1α
• 肝细胞癌
• HepG2细胞
• 增殖
• 侵袭
• 上皮间质转化

目的:探讨miR-377-5p与缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1,HIF-1α)的靶向关系以及通过控血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)信号通路对肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)细胞增殖、侵袭和EMT的调控作用。方法:qPCR检测35例人HCC组织及癌旁组织标本中miR-377-5p的表达水平。将HepG2细胞分为对照组、mimic NC组、miR-377-5p mimic组,qPCR检测转染效率;EdU染色、Transwell和Western blotting(WB)检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞增殖、侵袭及其增殖相关蛋白Ki-67、增殖细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)及上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)标志蛋白E-cadherin、N-cadherin表达的影响;qPCR、WB检测miR-377-5p过表达对HepG2细胞中,缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达的影响。荧光素酶报告基因实验验证miR-377-5p与HIF-1α基因的靶向关系。结果:HCC组织中miR-377-5p表达水平较癌旁组织降低(P<0.01)。与对照组相比,miR-377-5p mimic组HepG2细胞中miR-377-5p水平明显升高,细胞的增殖、侵袭能力降低(均P<0.01),EMT、N-cadherin表达水平降低(均P<0.01)而E-cadherin表达水平显著升高(P<0.01);miR-377-5p mimic组中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平均降低(P<0.01或P<0.05)。miR-377-5p靶向抑制HIF-1α基因表达,并抑制VEGF通路的激活(均P<0.05)。结论:miR-377-5p通过靶向抑制HIF-1α基因表达和下调VEGF信号通路从而抑制HepG2细胞的增殖、侵袭和EMT。

• 单位
  西南医科大学